Kit de detecção de micoplasma MycoAlert® PLUS

O MycoAlert® é um kit para detecção rápida de micoplasmas (mollicutes) em culturas de células. 

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O que são Micoplasmas? São “uns dos menores microrganismos viáveis”, invisíveis em microscopia comum e que frequentemente contaminam culturas celulares sem serem detectados. A contaminação com esses microrganismos pode afetar seriamente a confiabilidade, a reprodutibilidade e a consistência dos resultados experimentais ou do processo de fabricação de bioprodutos. Por isso há necessidade de testagem rápida e rotineira de culturas celulares.

 

O MycoAlert® oferece um workflow simples, com detecção da atividade de enzimas específicas de micoplasmas que não estão presentes nas células eucarióticas. Existem duas versões principais: o MycoAlert® “clássico” e o MycoAlert® PLUS (uma versão “melhorada” com maior emissão de luz, para equipamentos de luminometria menos sensíveis).

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Princípio do ensaio

Amostras da cultura (geralmente sobrenadante ou meio de cultura) são lisadas para liberar as enzimas micoplasmáticas (caso contenham micoplasmas viáveis). O substrato fornecido no kit reage com essas enzimas, catalisando a conversão de ADP em ATP. A enzima luciferase no reagente converte esse ATP em sinal de luz (bioluminescência).

 

O ensaio mede dois pontos de leitura:

• Leitura A (antes da adição do substrato) → nível basal de ATP / luz.

• Leitura B (após incubação com o substrato) → se houver micoplasmas, haverá aumento significativo do ATP e portanto maior luminescência.

• A razão (B/A) é usada para decidir presença ou ausência de micoplasma.​​​

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Dicas práticas para aplicação em laboratório:

• Teste as culturas celulares rotineiramente: testes com frequência permitem uma detecção precoce de contaminações.

• Use controles sempre — tanto negativo quanto positivo — para garantir que o ensaio está funcionando e que o luminômetro está operacional.

• Use volumes consistentes e tempos de incubação conforme o protocolo — pequenas variações podem afetar a leitura A ou B e, por consequência, a razão.

• Clarifique o sobrenadante para remover células ou detritos que possam interferir.

• Registre os dados (leitura A, B, razão, data, cultura testada) para histórico e auditoria.

 

 

O MycoAlert® PLUS está disponível nas versões de  10, 30, 50 ou 100 testes. Além dos kits, um controle de ensaio está disponível para compra, para validação dos resultado positivo e negativo.

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